Pemeriksaan Kimia klinik/ Darah

v  Pemeriksaan Glukosa

Metode           :           GOD PAP                                                      

Prinsip           :          D-Glukosa + H₂O + O₂       ^GOD       Ac.Gluconico + H₂O

2H₂O₂ + 4-Aminofenazon  +   fenol    ^POD         quinonmeimine + 4 H₂

Kadar glukosa ditentukan setelah pengoksidasian enzim dihadapkan dari oksidasi glukosa. Terbentuknya hydrogen peroksida bereaksi dibawah katalis dari peroksidasi dengan fenol dan 4-aminofenazon menjadi merah keunguan, quinoneimine tua sebagai indikator

      Alat dan Bahan

·         klinipet 10 ul dan 1000 ul

·         Photometer 5010

·         Tabung reaksi dan rak tabung.

·         Tip

·         Tissue

·         Serum

·         Reagen Glukosa

·         Standar Glukosa

      Cara kerja :

ü  Disiapkan tabung reaksi

ü  Dipipet masing-masing ke dalam tabung

	Blanko	Standar	Sampel
Standar	-	10 ul	-
Sampel	-	-	10 ul
Reagen Kerja	1000 µl	1000 µl	1000 µl

ü  Homogenkan , lalu diikunbasi selama 5 menit pada suhu 37° C kemudian  dibaca pada fotometer 5010 dengan menekan Glukosa.

ü  Nilai Normal :

Gula Darah Sewaktu                      : 140 mg/dl

Gula Darah Puasa                          : 110 mg/dl

Gula Darah 2 jam PP                      : <200 mg/dl

v  Pemeriksaan Cholesterol

Metode    :          CHOD-PAP

Prinsip     :          Kolesterol ditentukan secara enzimatik menggunakan kolesterol esterase dan kolesterol oksidase. Hidrogen peroksida membentuk warna merah bila bereaksi dengan 4-aminopenazone dan fenol dibawah pengaruh peroksidase.  Intensitas warna sebanding dengan kosentrasi kolesterol dan dapat ditentukan secara fotometrik.

Alat dan Bahan :

·         klinipet 10 ul dan 1000 ul

·         Photometer 5010

·         Tabung reaksi dan rak tabung

·         Tip.

·         Tissue

·         Serum

·         Reagen Cholesterol

·         Standar Cholesterol

Cara kerja :

ü  Disiapkan tabung reaksi

ü  Pipet masing-masing ke dalam tabung :

	Blanko	Standar	Sampel
Sampel	-	-	10 µl
Larutan standar	-	10 µl	-
Reagen Kerja	1000 µl	1000 µl

ü  Dicampur dengan baik, lalu diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37°C kemudian dibaca pada fotometer 5010 dengan menekan Cholesterol

Nilai normal  : Laki-laki dan Perempuan 125 – 200  mg/dl

v  Pemeriksaan Uric Acid (Asam Urat)

Metode          :          Test Enzymatic Colourimetric                                                

Prinsip           :           Urid Acid + H₂O + O₂     ^Uricase      Allantion + CO₂ +         H₂O₂

2H₂O₂  +  4-Aminoantipyrine  +  3,5-Dichloro-2-hyDroxy-         sulphonate   ^POD    Coloured quinonic derivative  +  4 H₂O

Alat dan Bahan :

·         klinipet 0 µl dan 1000 µl

·         Bayer RA.50

·         Tabung reaksi dan rak tabung

·         Tip

·         Tissue

·         Serum

·         Reageen Urid Acid

·         Standar Urid Acid

Cara kerja :

Disiapkan tabung reaksi

	Blanko	Standar	Sampel
Standar	-	20 µl	-
Sampel	-	-	20 µl
Reagen Kerja	1000 µl	1000 µl	1000 µl

Campur dengan baik, Lalu diinkubasi selama 10 menit padda suhu 37°C kemudian dibaca pada photometer 5010.

Nilai normal    :

Laki-laki               :      3,4 – 8,0 mg/dl

Perempuan            :  2,4 – 8,0 mg/dl

v  Pemeriksaan Billirubin T + D

Metode            :         Jen Drassik-Grof                                          

Prinsip             :

      Billirubin Total

Ditentukan oleh reaksi dengan diazotize asam sulfanilic, dalam cafein, dengan hasil akhir azopigmen. Reaksi yang sama tetapi ketiadaan cafein digunakan Billirubin Direk.

      Bilirubin Direk

Bilirubin bekerja berdasarkan reaksi diazo, yaitu reaksi langsung antara bilirubin dengan diazo yang akan menghasilkan Azobilirubin yang berwarna merah muda . Intensitas warna yang terbentuk setara dengan kadar bilirubin dan selanjutnya diukur dengan fotometer.

            Reaksi Bilirubin Direk

            Bilirubin + DSA → Direk Azo Bilirubin

Bilirubin Indirek

Bilirubin beraksi cepat dengan Diazotized Sulfanilic Acid (DSA) setelah penambahan reagen yang dapat mempercepat reaksi misalnya : Methanol, Intensitas warna diukur dengan fotometer untuk mendapat konsentrasi tertentu.

            Reaksi Bilirubin Indirek

            Bilirubin + DSA + Accelerator → (Methanol) Total Azo Bilirubin   

Alat dan Bahan :

·         Klinipet 20 µl, 1000 µl

·         Tabung Reaksi

·         Fotometer 5010

·         Tips

·         Serum

·         Reagen Bilirubin

Cara Kerja

Billirubin Direct

	Blanko	Sampel
Serum R eagen 1 Reagen 2 NaCl	100 µl 100 µl - 1000 µl	100 µl 100 µl 1 Tetes 1000 µl

Inkubasi selama 5 menit pada suhu 37°C kemudian dibaca pada layar RA.50 dengan menekan Bil.Direct

Billirubin Total

	Blanko	Sampel
Serum Reagen 1 Reagen 4 Reagen 2 Reagen 3	100 µl                     100 µl                              -                       500 Inkubasi  5 menit, lalu tambahkan                      500 µl	100 µl                      100 µl                    1 Tetes                      500 µl                 500 µl

Campur homogenkan, inkubasi 10 menit pada suhu 20-25 C.

Baca pada fotometer 5010

Nilai Normal :

Bilirubin Total            : <1,1 mg/dl

Bilirubin Direk          :<0,30 mg/dl

v  Pemeriksaan Urea

Metode             :        Test Enzymatic Colourimetri                                   

Prinsip              :       

 Urea + H2O O2      ^Urease       2NH₄⁺ + CO₂ ²⁻                                                                                         

2α-Ketoglutarate + 2NH₄⁺ + 2NADH      ^GLDH    2 Glutamate + 2

Urea dihidrolisis dengan adanya air dan urease membentuk ammonia dan karbondioksida, pada metode ini modifikasi bartheolin, ammonia bereaksi dengan hipoklorit dan salicilat membrntuk zat warna hijau.

Peningkatan absorbans pada 578 proporsional dengan konsentrasi urea dalam sampel.

Alat dan Bahan :

·         klinipet 10 µl dan 1000 µl

·         fhotometer 5010

·         Tabung reaksi dan rak tabung

·         Tip

·         Tissue

·         Serum

·         Larutan/Reagen Urea I

·         Larutan/Reagen II

·         Laritan Standar ureum

Cara kerja :

ü  Disiapkan tabung reaksi

ü  Pipet masing-masing ke dalam tabung :

	Standar	Sampel
Larutan Standar	10 µl	-
Sampel	-	10 µl
Reagen kerja	1000 µl	1000 µl

ü  Dicamspur dengan baik, Lalu diinkubasi selama 10 menit pada suhu 37°C kemudian dibaca pada fotometer 5010 dengan menekan Ureum

v  Pemeriksaan SGOT (ASAT)

Metode          :          Kinetik Berdasarkan rekomendasi IFCC

Prinsip           :                                                                                                           2-Oxoglutarate + L-aspartate       ^GOT      L-glutamate + Oxaloacetate

Oxaloacetate + NADH + H^{2         MDH}         L Malate + NAD⁺

Oxaloacetate yang dihasilkan sebanding dengan oksidasi dari NADH menjadi NAD. Reaksi tersebut menggambarkan aktifitas AST dan diukur secara fotometrik.

Alat dan bahan :

·         Klinipek 100µ1, 1000µ1

·         Tabung reaksi

·         Fotometer 5010

·         Rak Tabung

·         Tips

·         Serum

Cara Kerja :

	Pipet kedalam tabung
Reagen kerja Serum	500 ul 50 ul

Sebelum ditambahkan serum, reagen kerja di inkubasi terlebih dahulu selama 10 menit pada suhu 37⁰C, kemudian ditambahkan serum pada saat pembacaan

Panjang gelombang 340 nm

Nilai Normal

Laki-laki     : ≤ 42 U/L

Perempuan  : ≤ 37 U/L

v  Pemeriksaan SGPT

 Metode         :          Kinetik UV

Prinsip           :           L-alanine + a-Koaglutarat + L-alanin                L-glutamate +  Piruvat + NADH + H⁺                          L-laktat + NAD⁺

Piruvat yang dihasilkan sebanding dengan oksidasi dari NADH menjadi NAD. Reaksi tersebut menggambarkan aktifitas ALT dan diukur secara fotometrik.

Alat dan bahan :

·         Tabung  Reaksi  + Rak

·         RA.50

·         Serum

·         Reagen Kerja

·         klinipet

·         Tip

Cara Kerja:

	Pipet kedalam tabung
Reagen Kerja Serum	500 ul 50 ul

Sebelum ditambahkan serum, reagen kerja di inkubasi terlebih dahulu selama 10 menit pada suhu 37⁰C.

Serum ditambahkan pada saat pembacaan dengan panjang gelombang 340 nm.

Nilai Normal

Laku-laki   :  ≤ 42 U/L

Perempuan : ≤ 39 U/L

v  Pemeriksaan Urinalisa

      Pengenalan Alat

Pemeriksaan Urinalisa dilakukan dengan menggunakan alat Clinitek 50. Berikut ini adalah spesifikasi dari alat tersebut :

      Prinsip

Alat Clinitek 50 bekerja secara optikal density, dimana proses kerjanya menggunakan cahaya optik yang berwarna hijau dan merah. Dari warna tersebut , alat ini akan mendeteksi kertas sellulosa yang terpasang pada strip urine setelah strip dicelupakan kedalam urine.

Cara Kerja.

ü  On-kan alat Clinitek 50

ü  Strip urine (Combur Test) diambil lalu dicelupkan kedalam urine selama 1 menit

ü  Rembesan urine dibersihkan dengan kertas tissue

ü  Strip dilatakkan pada Chamber alat Clinitek 50, kemudian tekan START

ü  Proses identifikasi berlangsung dan hasil akan keluar melalui print out.

      Proses Kerja Clinitek 50

Kertas tes atau strip urine yang telah masuk ke alat Clinitek 50 akan dianalisa oleh alat melalui detektor, pada dwtektor ini alat akan mendeteksi kelainan-kelainan pada urine dengan menggunakan cahaya optik. Selanjutnya hasil deteksi akan dikirim kebagian analog digital convertion yang berfungsi untuk mengatur dan menampakkan hasil yang telah diananlisa oleh detektor sesuai dengan yang terjadi pada strip urine tersebut. Kemudian hasil dilanjutkan kebagian mikro prosessor dan bagian consentrasi yaitu bagian yang akan meneluarkan hasil dari strip urine melalui print out.

      Kalibrasi Clinitek 50

Cara kalibrasi alat Clinitek 50 ini tidak berbeda dengan alat urine yamg lain, dimana kalibrasi dilakukuan dengan menggunakan strip kalibrasi yang diperlakukan seperti pembacaan sampel, jadi caranya sebagai berikut:

Strip kalibrasi diletakkan pada chamber alat clinitek 50, kemudian tekan START

Proses identifikasi berlangsung dan hasil akan keluar melalui print out.

Apabila nilai atau hasil analisa terhadap strip kalibrasi yang keluar melalui print out masuk  dalam nilai range atau value, maka alat Clinitek 50 layak untuk digunakan. Sebaliknya, bila nilai range yang dikluarkan print out tidak masuk dalam nilai range atau non value, maka alat pembacaan strip kalibrasi di ulangi hingga nilai rangenya masuk. Jika pembacaan telah dilakukan berulang-ulang, namun nilai range belum juga masuk maka alat kemunglinan mengalami kerusakan dan alat tidak dapat digunakan untuk menganlisa.

v  Pemeriksaan Urine Lengkap

Metode          :           Carik Celup dengan 10 Parameter

Prinsip           : Sampel didalam tabung akan bereaksi setelah pada permukaan strip urine yang telah dilapisi kertas sellulosa berupa adanya berubahan warna pada masing-masing parameter,Selanjutnya akan di analisa secara optikal density pada alat Clinitek 50.

Alat dan Bahan :

·         Strip Urine

·         Cliniyek 50

·         Urine

Cara Kerja :

ü  Masukkan Urine kedalam tabung reaksi

ü  Celupakan strip pada urine

ü  Diamkan selama ± 1menit kemudian sentuhkan pada kertas tissue rembesan urine tersebut

ü  Dimasukkan kedalam penyimpanan strip kemudian tekan SET  , alat akan mulai menganalisa 10 parameter dan akan dikeluarkan melalui print out.

Hasil pembacaan Alat :

Adapun hasil pembacaan alat yang dikeluarkan yaitu :

SG                  :           Berat Jenis Urine

pH                   :           Tingkat Keasaman Urine

LEU                :           Ada tidaknya Leukosit dalam urine

NIT                  :           Ada tidaknya Nitrit (bakteri) dalam urine

PRO               :           Ada tidaknya Protein dalam urine

GLU                :           Ada tidaknya Glukosa dalam urine

KET                :           Ada tidaknya benda-benda keton dalam urine

UBG               :           Ada tidaknya Urobilinogen dalam urine

BIL                  :           Ada tidaknya Bilirubin dalam urine

ERY                :           Ada tidaknya Eritrosit dalam urine